Illumina 시퀀싱 플랫폼에서의 검증 런을 위한 PhiX 로딩 농도

08/23/2022


PhiX 검증 런은 기기의 적절한 하드웨어 및 소프트웨어 성능을 확인합니다. Illumina PhiX Control Library는 A, T, G 및 C 뉴클레오티드를 비교적 동일하게 나타내는 균형 잡힌 유전체입니다. PhiX에는 인덱스가 없으며 인덱스 리드 성능을 평가하기에 적절한 도구가 아닙니다.

PhiX 컨트롤 런은 다음 표에 나열된 대로 각 플랫폼에 대한 최적의 클러스터 밀도 내에 속하는 것이 중요합니다.

플랫폼 최적의 로딩 농도 최적의 원시 클러스터 밀도
iSeq 100 100 pM 해당 없음**
MiniSeq 1.4 pM 170-220K 클러스터/mm2
MiSeq v2 시약 12.5 pM 1000-1200K 클러스터/mm2
MiSeq v3 시약 20 pM 1200-1400K 클러스터/mm2
NextSeq 500/550 고출력 시약 1.5 pM 170-220K 클러스터/mm2
NextSeq 500/550 Mid Output 시약 1.5 pM 170-220K 클러스터/mm2
NextSeq 1000/2000 650 pM 해당 없음**
HiSeq 2000/2500 고출력 v3 12 pM 750-850K 클러스터/mm2
HiSeq 2000/2500 고출력 v4 18 pM 950-1050K 클러스터/mm2
HiSeq 2500 Rapid Run v2 12 pM 850-1000K 클러스터/mm2
HiSeq 3000/4000 2-3nM * 해당 없음**
NovaSeq - 표준 워크플로우 250 pM*** 해당 없음**
NovaSeq - XP 워크플로우 100 pM*** 해당 없음**

*변성되지 않은 pre-ExAmp 농도
**패턴된 플로우 셀은 웰이 주문된 나노웰로 구성되며, 런마다 보고된 클러스터 밀도의 변동이 없습니다.
***최종 로딩 농도

런 길이와 파라미터는 문제 해결 요구 사항에 따라 다르지만, 품질 점수를 생성하려면 리드 1 및 2에 최소 26사이클이 있어야 합니다.

시퀀싱 플랫폼을 위한 PhiX 준비에 대한 자세한 내용은 다음 문서를 참조하십시오.