패턴화된 플로우 셀은 기점을 사용하여 이미징의 첫 번째 사이클 전에 기기 광학 시스템을 플로우 셀에 정렬합니다. 기점은 클러스터 생성 중에 클러스터로 채워집니다(그림 1). 기기가 런 시작 시 이러한 기준을 찾을 수 없는 경우(그림 2), “기계를 등록할 수 없음” 오류가 표시되고 런이 중지됩니다.

그림 1. 클러스터가 있는 기준의 이미지.

그림 2. 클러스터가 거의 없거나 전혀 없는 기준 이미지.

이러한 오류의 가장 빈번한 원인은 다음과 같습니다.

• 라이브러리 로딩, 유체 또는 온도와 관련된 클러스터링 실패
• 광학 정렬 문제
• 저강도 문제
• 플로우 셀 품질 문제

문제 해결 단계:

1. 자동 센터 이미지(대부분의 이미지는 검은색으로 표시됨)는 여기에서 Alignment 폴더를 확인하십시오. C:\ProgramData\\Illumina \NovaSeq\\NovaSeqTemp\\[Run_Folder]\\Alignment. 
   
   1. Alignment 폴더가 없는 경우 여기에서 Logs 폴더를 수집합니다. C:\ProgramData\\Illumina \NovaSeq\\NovaSeqTemp\\[Run_Folder]\. 이메일에 첨부하여 압축 폴더를 Illumina 기술 지원팀으로 보내십시오.
2. Autocenter 이미지 파일 확장명을 확인합니다. 
   
   1. 확장자가 *.jpeg인 경우 Paint와 같은 Microsoft 프로그램에서 자동 센터 이미지를 열어 클러스터를 확인합니다. 참고: 화면의 전체 기점에 맞추고 클러스터를 보기 위해 이미지 크기를 줄여야 할 수 있습니다.
   2. 확장 프로그램이 *.tiff인 경우, 자동 센터 이미지를 보려면 기기에 설치되지 않은 특정 프로그램이 필요합니다. 압축된 Alignment 폴더를 안전한 FTP 사이트에 업로드하는 방법에 대한 지침은 Illumina 기술 지원 부서에 문의하십시오.
3. 기기의 전원을 껐다 켜고 시스템 점검을 수행합니다. 자세한 내용은 NovaSeq 6000에서 시스템 상태 점검을 수행하는 방법을 참조하세요.
4. 시스템 점검 테스트가 통과하면 기기에서 시퀀싱을 진행합니다.

수집할 파일:

• C:\ProgramData\\Illumina \NovaSeq\\NovaSeqTemp\\[Run_Folder]\\Alignment
• C:\ProgramData\Illumina \NovaSeq\NovaSeqTemp\[Run_Folder]\\Logs( Alignment 폴더가 없는 경우)
• 시스템 점검 결과

(동일한 쪽에서) 새 런을 시작한 후 또 다른 “기준을 등록할 수 없음” 오류가 발생하는 경우 클러스터링 문제 또는 기기 문제를 나타낼 수 있습니다. 추가 지원은 Illumina 기술 지원에 문의하십시오.